在液氮凍存細(xì)胞的過程中,存在被其他污染的風(fēng)險(xiǎn)。污染主要來自以下幾個(gè)方面:
1. 細(xì)菌污染:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有時(shí)會有細(xì)菌污染。這些細(xì)菌可能在液氮罐的連接部分或密封件上生長,進(jìn)而進(jìn)入液氮中當(dāng)。細(xì)胞被凍存在液氮中時(shí),這些細(xì)菌也會被凍存,并在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)一同復(fù)蘇,從而對細(xì)胞造成污染
2. 支原體污染:支原體是一種常見的細(xì)胞培養(yǎng)污染物,它們可以通過空氣、水、培養(yǎng)基等途徑傳播。當(dāng)細(xì)胞被凍存在液氮中時(shí),支原體也會被凍存,并在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)一同復(fù)蘇,從而對細(xì)胞造成污染。
3. 化學(xué)污染:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,可能會使用到一些化學(xué)物質(zhì),如血清、這抗些生物素質(zhì)、可抗能癌會藥在物液等氮。中殘留,并在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)一同復(fù)蘇,從而對細(xì)胞造成污染
4. 同種異體污染:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,可能會使用到一些同種異體細(xì)胞或組織,如血清、血漿、組織漿等。這些物質(zhì)可能會在液氮中殘留,并在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)一同復(fù)蘇,從而對細(xì)胞造成污染。
為了降低液氮凍存細(xì)胞過程中的污染風(fēng)險(xiǎn),可以采取以下措施:
1. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,要保持無菌操作,避免細(xì)菌和支原體等污染物進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)體系中。
2. 在液氮凍存細(xì)胞前,要對細(xì)胞進(jìn)行仔細(xì)的清洗和純化,去除其中的化學(xué)物質(zhì)和同種異體物質(zhì)等污染物。
3. 在液氮凍存細(xì)胞過程中,要使用高質(zhì)量的冷凍保護(hù)劑,如二甲基亞砜(DMSO)、甘油等,以減少細(xì)胞的損傷和死亡。
4. 在液氮凍存細(xì)胞過程中,要保證細(xì)胞的溫度下降速度緩慢且均勻,以減少細(xì)胞的損傷和死亡。
5.凍存細(xì)胞過程中,要定期檢查液氮的純度和質(zhì)量,以確保其不會對細(xì)胞造成污染。
6. 在液氮凍存細(xì)胞過程中,要使用密封性好的液氮罐和密封件,以避免細(xì)菌和支原體等污染物進(jìn)入液氮中。
7. 在細(xì)胞復(fù)蘇過程中,要使用適當(dāng)?shù)膹?fù)蘇方法,如使用37℃水浴使細(xì)胞迅速復(fù)蘇,以減少細(xì)胞的損傷和死亡。
8. 在細(xì)胞復(fù)蘇過程中,要使用無菌水或無血清培養(yǎng)基等物質(zhì)清洗細(xì)胞,以去除其中的污染物。液氦杜瓦瓶
9. 在細(xì)胞復(fù)蘇過程中,要定期檢查細(xì)胞的生長狀態(tài)和質(zhì)量,以確保其沒有受到污染。液氦杜瓦瓶
總之,通過采取一系列預(yù)防措施可以降低液氮凍存細(xì)胞但過是程,中在的實(shí)污際染操風(fēng)作險(xiǎn)中。仍然需要注意細(xì)節(jié)問題,避免出現(xiàn)不必要的錯(cuò)誤導(dǎo)致污染發(fā)生。