乳雙歧桿菌U9是一株具有優(yōu)良益生功能的乳桿菌。為了保證U9菌株活性,為工業(yè)化益生菌制劑生產(chǎn)提供穩(wěn)定菌種,利用液氮深冷方式對U9菌株進行冷凍保藏。以冷凍存活率為評價指標,對
乳雙歧桿菌U9是一株具有優(yōu)良益生功能的乳桿菌。為了保證U9菌株活性,為工業(yè)化益生菌制劑生產(chǎn)提供穩(wěn)定菌種,利用液氮深冷方式對U9菌株進行冷凍保藏。以冷凍存活率為評價指標,對冷凍保護劑種類進行篩選,并對保護劑配方進行正交試驗優(yōu)化。結(jié)果表明,甘油、海藻糖、脫脂乳粉及維生素C4種保護劑能對乳雙歧桿菌U9起到良好的保護作用;正交試驗優(yōu)化確定的保護劑配方為甘油2%、海藻糖7.5%、脫脂乳粉7.5%、維生素C 0.1%,菌體冷凍后存活率達到94%。
MVE液氮罐
乳雙歧桿菌是人體腸道中常見的益生菌,也是世界上被廣泛研究的益生菌菌種之一,在維護人體健康中扮演重要角色。據(jù)統(tǒng)計,有300多種科學出版物都對乳雙歧桿菌功能特性進行了描述,其中130多種報道涉及其人體臨床研究。大量報道表明,乳雙歧桿菌的保健作用已經(jīng)在許多胃腸健康和免疫功能臨床研究中得到了驗證。目前,人們已經(jīng)把乳雙歧桿菌制備成了發(fā)酵乳制品的直投發(fā)酵劑、膳食補充劑以及藥用制劑等。
在乳雙歧桿菌工業(yè)化使用過程中,菌種活力的保持與工業(yè)化生產(chǎn)緊密相關。傳統(tǒng)的保菌方式主要是采用真空冷凍干燥的方法,但存在設備成本較高、菌種存活率低等問題。
因此,探究一種更為簡便的保菌方式顯得尤為重要。液氮深冷保菌方式因其實驗操作簡便、成本較低、菌種活力高等優(yōu)勢,越發(fā)廣泛地應用到菌種保藏中。有研究采用3%甘油、5%海藻糖、5%果糖、8%脫脂乳、0.05%維生素C、0.05%L-谷氨酸(L-GLU)作為保護劑配方,對長雙歧桿菌起到良好保護作用,保證在深冷條件下存活率接近100%。針對不同菌株研究特異性冷凍保護劑是菌株深冷保藏的關鍵。
冷凍保護劑分為滲透型、非滲透型、半滲透型和抗氧化型4種,不同類型保護劑的保護機制也不同。
MVE液氮罐
液氮深冷冷凍技術,能耗小,安全性高,生產(chǎn)成本低,能較好地提升菌種的存活率,為菌種的保藏提供了更有效便捷的方式。冷凍保藏效果的關鍵在于冷凍保護劑的選擇,通過對保護劑種類進行篩選,確定了甘油、海藻糖、脫脂乳粉和維生素C4種保護劑,它們能夠?qū)θ殡p歧桿菌U9在液氮中的冷凍保藏起到良好的保護作用,并借助正交試驗及驗證試驗對保護劑濃度進行優(yōu)化,確定保護劑配方為2%甘油、7.5%海藻糖、7.5%脫脂乳粉、0.1%維生素C。利用優(yōu)化后的保護劑配方對乳雙歧桿菌U9進行凍干保護,存活率可達94%,為乳雙歧桿菌U9在工業(yè)化生產(chǎn)中的應用提供理論依據(jù)。